3.
Методы идентификации грам(+) бактерий.
3.4. Трегалоза-маннитол бульонный тест.
3.5. Окислительно-ферментативный тест с маннитом.
3.14. Желчно-эскулиновый тест.
3.17. PYR(L-Pyrrolidonyl-b-Naphthylamide)-тест.
3.18. Тест толерантности к 6,5% NaCl.
3.12. CAMP-тест.
Принцип.
Стрептококки группы B продуцируют белковоподобную внеклеточную субстанцию (САМР-фактор),
которая способна синергично взаимодействовать с бета-токсином, продуцируемым
некоторыми штаммами S.aureus. Если оба
микроорганизма засеять на кровяной агар перпендикулярно друг другу (но чтобы
они не соприкасались!), в точке проекции их предполагаемого соединения
образуется клиновидная зона нарастающего гемолиза эритроцитов.
Ход
исследования.
Þ
На кровяной агар
ниже центра чашки засевают в виде полосы продуцирующий бета-токсин S.aureus.
Þ
Перпендикулярно к
засеянному штамму гемолитического стафилококка засевают отдельными полосками
изучаемые культуры бета-гемолитического стрептококка. (Линии не должны соприкасаться!)
Þ
Инкубируют посевы
в течении ночи при 35ºC аэробно, или в
течении 6 часов в атмосфере 5-10% содержания , но в этих условиях специфичность теста снижается.
Þ
Изучают чашки на
наличие клиновидной зоны нарастающего гемолиза эритроцитов в точке проекции
предполагаемого пересечения стрептококка и стафилококка. Этот тест положительный у стрептококков группы B (эталонный штамм S.agalactiae АТСС 13813), и отрицательный
(зона нарастающего бета-гемолиза отсутствует) – у прочих стрептокков
(эталонный штамм S.pyogenes АТСС
19615).
Ограничения.
Положительный CAMP-тест позволяет лишь предположительно отнести изучаемый
бета-гемолитический стрептококк к группе B.