Ввод и редактирование текста

3. Методы идентификации грам(+) бактерий.

3.4. Трегалоза-маннитол бульонный тест.

Принцип. Этот тест используется для предварительной дифференциации S. epidermidis от других коагулазо(-) стафилококков. Большинство из них, в отличие от S. epidermidis, способны ферментировать трегалозу и/или маннит в бульоне с индикатором.

Реагенты. Используют коммерческий трегалоза-маннитол бульон (2% каждого углевода) с индикатором пурпурно-красным (Difco).

Ход исследования.

Þ Разливают по 200 мкл трегалоза-маннитол бульона в необходимое число лунок многоячеистого планшета или в микропробирки.

Þ Готовят густой инокулят культуры коагулазо(-) стафилококка непосредственно в бульоне.

Þ Инкубируют 4-6 ч при 35ºC на встряхивателе, либо без встряхивания при ночной инкубации.

Þ Изучают изменение цвета в бульоне.

Þ При положительном результате появляется желтое окрашивание бульона, свидетельствующее о ферментации трегалозы и/или маннитола (эталонный штамм S.haemolyticusАТСС 29970); при отрицательной реакции ферментации углеводов не происходит и бульон остается окрашенным в пурпурный или пурпурно-серый цвет,что предположительно указывает на S.epidermidis (эталонный штамм АТСС 14990).

Ограничения и предосторожности.

1) Точность теста >95% при выявлении ферментирующих трегалозу и/или маннитол коагулазо (-) стафилококков, не относящихся к S.epidermidis.

2) При ускоренном учете реакции бульонные культуры следует инкубировать 4-6 ч при постоянной встряхивании; при инкубации в течение ночи посевы не встряхивают.

3) Некоторые штаммы S.capitis ферментируют углеводы медленно и дают до 3% ложно отрицательных реакций через 6 ч.