3. Методы идентификации грам(+) бактерий.

3.1. Каталазный тест².

3.2. Коагулазный тест.

3.3. Новобиоционовый тест.

3.4. Трегалоза-маннитол бульонный тест.

3.5. Окислительно-ферментативный тест с маннитом.

3.6. ДНК-азный тест³.

3.7. Лецитиназный тест.

3.8. Фосфатазный тест.

3.9. Гемолитический тест.

3.10. Бацитрациновый тест.

3.11. Иммунологические тесты.

3.12. CAMP-тест.

3.13. Гиппуратный тест.

3.14. Желчно-эскулиновый тест.

3.15. Желчные тесты.

3.16. Оптохиновый тест.

3.17. PYR(L-Pyrrolidonyl-b-Naphthylamide)-тест.

3.18. Тест толерантности к 6,5% NaCl.

К началу главы | Далее

3.16. Оптохиновый тест.

Принцип. Рост колоний S.pneumoniae подавляется оптохином (этилгидрокупреин дигидрохлорид) при наложении бумажных дисков (с нагрузкой 5 мкг реагента) на засеянную культурой поверхность агара.

Реагенты. Оптохиновые диски (Difco, Becton, Dickinson).

Ход исследования.

Þ Засевают чистую культуру предполагаемого пневмококка на кровяной агар по квадрантам “секторами”.

Þ Накладывают оптохиновый диск (диаметром 6 мм) на верхушке 1-го и 2-го квадрантов.

Þ После ночной (18 ч) инкубации посевов в атмосфере 5-10% при 35ºC учитывают результаты, измеряя диаметр зоны задержки роста, включающий диаметр диска.

Интерпретация результатов.

1. Зона задержки роста 14 мм в диаметре расценивается как положительный результат и позволяет предположить наличие S.pneumoniae.

2. Отсутствие зоны задержки роста присуще альфа-гемолитическим стрептококкам, не относящимся к пневмококку.

3. Диаметр зоны задержки роста <14 мм характеризуется как сомнительный результат, который требует постановки желчного теста.

Контроль качества. В качестве положительного и отрицательного контроля используют, соответственно, S.pneumoniae АТСС 6303 и S.salivarius АТСС 13419.

Ограничения и предосторожности.

1) Некоторые штаммы S.pneumoniae не подавляются оптохином, а у отдельных изолятов зеленящих стрептококков образуется узкая зона задержки роста.

При сомнительном результате следует проводить желчный тест.