Ввод и редактирование текста

3. Методы идентификации грам(+) бактерий.

3.18. Тест толерантности к 6,5% NaCl.

Принцип. Энтерококки можно дифференцировать от неэнтерококковых стрептококков группы D по их способности расти в солевом (6,5%) бульоне.

Среда.

Ингредиенты:

триптиказо-соевый бульон (Difco) 15 г

NaCl 32,5 г

деионизированная вода 500 мл

Þ Растворяют ингредиенты и по 6 мл среды разливают в пробирки с завинчивающимися крышками.

Þ Стерилизуют автоклавированием при 121ºС 15 мин.

Ход исследования.

Þ Инокулируют 1-2 колонии изучаемых бактерий в 6,5% солевой бульон.

Þ Инкубируют при 35ºC аэробно в течение ночи.

Þ Изучают наличие роста (помутнение бульона), при отрицательном результате реинкубируют посевы еще 24 ч.

Интерпретация результатов.

· Каталазо(-) грам(+) кокки, с клеточным расположением парами и цепочками, имеющие D-групповой антиген и растущие в солевом бульоне, относятся к энтерококкам (большинство штаммов дает рост через 24 ч).

· Стрептококки группы D, не растущие в солевом бульоне после 48 ч инкубации, расценивается как “неэнтерококковые стрептококки группы D”.

Контроль качества. Положительный:Enterococcus faecalis АТСС 19433 или любые энтерококки. Отрицательный: Streptococcus bovis АТСС 33317.

Ограничения.

1) Помимо энтерококков другие грам(+) кокки (стрептококки группы B, аэрококки, педиококки и стафилококки) могут расти в 6,5% солевом бульоне.

2) Для того чтобы предположительно отнести микробные изоляты к энтерококкам, они должны быть каталазо(-) грам(+) кокками, располагающимися в мазке парами и цепочками, но не тетрадами и гроздьями, и расти в солевом бульоне. Добавочные тесты, основанные на определении D-группового антигена или пирролидонил пептидазы, следует использовать только на завершающем этапе идентификации.